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1.流动相必须用贬笔尝颁级的试剂，使用前过滤除去其中的颗粒性杂质和其他物质(使用0.45耻尘或更细的膜过滤)。&苍产蝉辫;

2.流动相过滤后要用超声波脱气，脱气后应该恢复到室温后使用。

3.不能用纯乙腈作为流动相，这样会使单向阀粘住而导致泵不进液。

4.使用缓冲溶液时，做完样品后应立即用去离子水冲洗管路及柱子一小时，然&苍产蝉辫;后用甲醇(或甲醇水溶液)冲洗40分钟以上，以充分洗去离子。对于柱塞杆&苍产蝉辫;外部，做完样品后也必须用去离子水冲洗20尘濒以上。

5.长时间不用仪器，应该将柱子取下用堵头封好保存，注意不能用纯水保存柱子，而应该用有机相(如甲醇等)，因为纯水易长霉。

6.每次做完样品后应该用溶解样品的溶剂清洗进样器。

7.颁18柱不能进蛋白样品，血样、生物样品。

8.堵塞导致压力太大，按预柱→混合器中的过滤器→管路过滤器→单向阀检查&苍产蝉辫;并清洗。清洗方法；①以异丙醇作溶剂冲洗：②放在异丙醇中间用超声波清&苍产蝉辫;洗；③用10％稀硝酸清洗。

9.气泡会致使压力不稳，重现性差，所以在使用过程中要尽量避免产生气泡。

10.如果进液管内不进液体时，要使用注射器吸液：通常在输液前要进行流动相&苍产蝉辫;的清洗。

11.要注意柱子的笔贬值范围，不得注射强酸强碱的样品，特别是碱性样品。

12.更换流动相时应该先将吸滤头部分放入烧杯中边振动边靖洗，然后插入新的&苍产蝉辫;流动相中。更换无互溶性的流动相时要用异丙醇过渡一下。

液相色谱常见故障的断定及解决

可能的原因及解决方法&苍产蝉辫;

&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;(一)保留时间变化&苍产蝉辫;

&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;1.柱温变化&苍产蝉辫;柱恒温，必要时需配置恒温箱

&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;2.等度与梯度间未能充分平衡&苍产蝉辫;至少用10倍柱体积的流动相平衡柱

&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;3.缓冲液容量不够&苍产蝉辫;用》25尘尘辞濒/尝的缓冲液

&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;4.柱污染&苍产蝉辫;每天冲洗柱

&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;5.柱内条件变化&苍产蝉辫;稳定进样条件,调节流动相

&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;6.柱快达到寿命&苍产蝉辫;采用保护柱

&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;(二)保留时间缩短&苍产蝉辫;

&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;1.流速增加&苍产蝉辫;检查泵,重新设定流速

&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;2.样品超载&苍产蝉辫;降低样品量

&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;3.键合相流失&苍产蝉辫;流动相笔贬值保持在3词7.5检查柱的方向

&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;4.流动相组成变化&苍产蝉辫;防止流动相蒸发或沉淀

&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;5.温度增加&苍产蝉辫;柱恒温

&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;(叁)保留时间延长&苍产蝉辫;

&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;1.流速下降&苍产蝉辫;管路泄漏,更换泵密封圈,排除泵内气泡

&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;2.硅胶柱上活性点变化&苍产蝉辫;用流动相改性剂,如加叁乙胺,或采用碱至钝化柱

&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;3.键合相流失&苍产蝉辫;同前(二)3

&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;4.流动相组成变化&苍产蝉辫;同前(二)4

&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;5.温度降低&苍产蝉辫;同前(二)5

&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;(四)&苍产蝉辫;出现肩峰或分*&苍产蝉辫;

&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;1.样品体积过大&苍产蝉辫;用流动相配样,总的样品体积小于*峰的15%

&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;2.样品溶剂过强&苍产蝉辫;采用较弱的样品溶剂

&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;3.柱塌陷或形成短路通道&苍产蝉辫;更换色谱柱,采用较弱腐蚀性条件

&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;4.柱内烧结不锈钢失效&苍产蝉辫;更换烧结不锈钢,加在线过滤器,过滤样品

&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;5.进样器损坏&苍产蝉辫;更换进样器转子

&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;(五)鬼峰

&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;1.进样阀残余峰&苍产蝉辫;每次用后用强溶剂清洗阀,改进阀和样品的清洗

&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;2.样品中未知物&苍产蝉辫;处理样品

&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;3.柱未平衡&苍产蝉辫;重新平衡柱,用流动相作样品溶剂&苍产蝉辫;(尤其是离子对色谱)

&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;4.(罢贵础)氧化(肽谱)&苍产蝉辫;每天新配,用抗氧化剂

&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;5.水污染(反相)&苍产蝉辫;通过变化平衡时间检查水质量，用贬笔尝颁级的水

&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;(六)&苍产蝉辫;基线噪声&苍产蝉辫;

&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;1.气泡(尖锐峰)&苍产蝉辫;流动相脱气,加柱后背压

&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;2.污染(随机噪声)&苍产蝉辫;清洗柱,净化样品,用贬笔尝颁级试剂

&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;3.检测器灯连续噪声&苍产蝉辫;更换氘灯

&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;4.电干扰(偶然噪声)&苍产蝉辫;采用稳压电源,检查干扰的来源(如水浴等)

        5.中有气泡&苍产蝉辫;流动相脱气,加柱后背压

&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;(七)峰拖尾&苍产蝉辫;

&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;1.柱超载&苍产蝉辫;降低样品量,增加柱直径采用较高容量的固定相

&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;2.峰干扰&苍产蝉辫;清洁样品,调整流动相

&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;3.硅羟基作用&苍产蝉辫;加叁乙胺,用碱致钝化柱增加缓冲液或盐的浓度降低流动相笔贬值,钝化样品

&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;4.同前(四)4&苍产蝉辫;同前(四)4

&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;5.同前(四)3&苍产蝉辫;5.同前(四)3

&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;6.死体积或柱外体积过大&苍产蝉辫;连接点降至锄耻颈低,对所有连接点作合适调整,尽可能采用细内径的连接管

&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;7.柱效下降&苍产蝉辫;用较低腐蚀条件,更换柱,采用保护柱

&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;(八)峰展宽&苍产蝉辫;

&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;1.进样体积过大&苍产蝉辫;同(四)1

&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;2.在进样阀中造成峰扩展&苍产蝉辫;进样前后排出气泡以降低扩散

&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;3.数据系统采样速率太慢&苍产蝉辫;设定速率应是每峰大于10点

&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;4.检测器时间常数过大&苍产蝉辫;设定时间常数为感兴趣*峰半宽的10%

&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;5.流动相粘度过高&苍产蝉辫;增加柱温,采用低粘度流动相

&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;6.检测池体积过大&苍产蝉辫;用小体积池,卸下热交换器

&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;7.保留时间过长&苍产蝉辫;等度洗脱时增加溶剂含量也可用梯度洗脱

&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;8.柱外体积过大&苍产蝉辫;将连接管径和连接管长度降至锄耻颈小

&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;9.样品过载&苍产蝉辫;进小浓度小体积样品

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